冷凍切片機操作方法 ①取材。 ?、谌〕鼋M織支承器,放平擺好組織,周邊滴上包埋劑,速放于冷凍臺上,冰凍。 ?、蹖⒗鋬龊玫慕M織塊,夾緊于切片機持承器上,啟動粗進退鍵,轉(zhuǎn)動旋鈕,將組織修平。 ?、苷{(diào)好欲切的厚度,一般在5~10um間。 ?、菡{(diào)好防卷板。制作冰凍切片,關(guān)鍵在于防卷板的調(diào)節(jié)上,這就要求操作者要細心,準確地將其調(diào)較好,調(diào)校至適當?shù)奈恢?。切片時,切出的切片能在*時間順利地通過刀防卷板間的通道,平整地躺在持刀器的鐵板上。這時便可掀起防卷板,取一載玻片,將其附貼上即可。 注意事項: ①防卷板及切片刀和持刀架上的板塊應(yīng)保持干凈,需經(jīng)常用毛筆挑除切片殘余 和用柔軟的紙張擦。有時需要每切完一張切片后就用紙擦一次。因為這個地方是切片通過和附貼的地方,如果有殘余的包埋劑粘于刀或板上,將會破壞甚至撕裂切片,便切片不能完整切出。 ?、诜胖媒M織冰凍前,應(yīng)視組織的形狀及走勢來放置,所謂“砍柴看柴勢”,切片 也是如此,如果胡亂放置,就不能收到很好的效果。③組織塊不須經(jīng)各種固定液固定。 ?、墚斍衅瑫r,如果發(fā)現(xiàn)冰凍過度時,可將冰凍的組織連同支承器取出來,在室 溫停留片刻,再行切片,或者用口中哈氣,或者用大拇指按壓組織塊,以此來軟化組織,再行切片。另者,調(diào)高冰凍點。 ?、萦糜诟劫N切片的載玻片,不能存放于冷凍處,于室溫存放即可。因為當附貼 切片時,從室溫中取出的載玻片與冷凍箱中的切片有一種溫度差,當溫度較高的載玻片附貼上溫度較低的切片時,由于兩種物質(zhì)間溫度的差別,當它們碰撞在一起時,分子彼此間發(fā)生轉(zhuǎn)移而產(chǎn)生了一種吸附力,使切片與載玻片牢固地附貼在一起。如果使用冷藏的載玻片來附貼切片,由于溫度相同,沒有發(fā)生上述的現(xiàn)象。 |